كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة هي طريقة تحليل كيميائي تعتمد على استخدام طبقة ماصة بسمك 0.1-0.5 مم كمرحلة ثابتة. يمكن استخدام طريقة TLC في مختلف المجالات وتسمح بتحديد مجموعة متنوعة من المركبات الكيميائية.
مبدأ الطريقة
ولدت طريقة كروماتوغرافيا الطبقة الرقيقة من كروماتوغرافيا الورق وأجريت التجارب الأولى في الثمانينيات من القرن التاسع عشر. لم يبدأ الاستخدام النشط لهذا التحليل إلا بعد عام 1938.
تشتمل تقنية TLC على طور متحرك (eluent) ، ومرحلة ثابتة (مادة ماصة) ، وتحليلي. يتم تطبيق المرحلة الثابتة وتثبيتها على لوحة خاصة. يمكن أن تكون اللوحة مصنوعة من الزجاج أو الألومنيوم أو البلاستيك - وهي ركائز قابلة لإعادة الاستخدام يجب غسلها وتجفيفها وتحضيرها لتطبيق المادة الماصة بعد كل استخدام. من الممكن أيضًا استخدام الألواح الورقية التي يتم التخلص منها بعد الاستخدام.
غالبًا ما يستخدم هلام السيليكا كمرحلة ثابتة ، ولكن من الممكن استخدام مواد ماصة أخرى ، مثل أكسيد الألومنيوم. عند استخدام هذه المادة الماصة أو تلك ، يجب اتباع التقنية بدقة حتى تكون النتيجة دقيقة ، على سبيل المثال ، لأن هلام السيليكا يمكن أن يعطي نتيجة غير صحيحة إذا كان الهواء في المختبر رطبًا جدًا.
تستخدم المذيبات كمرحلة متحركة ، على سبيل المثال ، الماء ، وحمض الخليك ، والإيثانول ، والأسيتون ، والبنزين. يجب أن يؤخذ اختيار المذيب بمسؤولية ، لأن نتيجة الفصل اللوني تعتمد بشكل مباشر على صفاته (اللزوجة ، الكثافة ، النقاء). يتم اختيار مذيب فردي لكل عينة تم تحليلها.
التحليلات
يجب تخفيف العينة في مذيب. إذا لم يحدث الذوبان الكامل وبقيت الكثير من الشوائب ، فيمكن تنظيف العينة عن طريق الاستخراج.
يمكن تطبيق العينة على اللوحة تلقائيًا أو يدويًا. يستخدم التطبيق التلقائي طريقة microspray حيث يتم رش كل عينة على المنطقة المناسبة من الركيزة. للتطبيق اليدوي ، يتم استخدام الماصة الدقيقة. يتم وضع علامات قلم رصاص على اللوحة لكل عينة. يتم تطبيق كل عينة بشعرية على الصفيحة في سطر واحد على مسافة كافية من العلامات حتى لا تتفاعل مع الكربون من الرصاص.
يتم وضع الصفيحة في إناء ، يُسكب في قاعه الشاحن. يتم وضع الدعامة بحافة واحدة في الوعاء حتى الخط المحدد. الوعاء مغلق بإحكام لتجنب تبخر الطور المتحرك. تحت تأثير القوى الشعرية ، يبدأ eluent في رفع الطبقة الماصة. عندما يصل eluent إلى مستوى معين ، تتم إزالة اللوحة من الوعاء وتجفيفها.
إذا لم يكن للمادة المرغوبة لون ، فلن تكون مرئية على الركيزة. لذلك ، يتم إجراء التصور - معالجة اللوحة ببخار اليود أو الأصباغ الأخرى.
بعد هذه المعالجة ، يتم تقييم النتيجة. تظهر مناطق ملونة متفاوتة الشدة على المادة الماصة. لتحديد مادة (أو مجموعة مواد) ، تتم مقارنة المناطق الملونة وحجمها وكثافتها وقدرتها على الحركة مع عينة مرجعية.
تُستخدم طريقة TLC على نطاق واسع لأنها سريعة ورخيصة ودقيقة وبديهية ولا تتطلب معدات معقدة وسهلة التفسير.
